设计一个试验,现已知某环境中有一种能产生淀粉酶的细菌,请设计一合理实验,获得该细菌中的淀粉酶基因序列并列出其在大肠杆菌中表达的实验步骤.

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/03 02:31:05
设计一个试验,现已知某环境中有一种能产生淀粉酶的细菌,请设计一合理实验,获得该细菌中的淀粉酶基因序列并列出其在大肠杆菌中表达的实验步骤.

设计一个试验,现已知某环境中有一种能产生淀粉酶的细菌,请设计一合理实验,获得该细菌中的淀粉酶基因序列并列出其在大肠杆菌中表达的实验步骤.
设计一个试验,
现已知某环境中有一种能产生淀粉酶的细菌,请设计一合理实验,获得该细菌中的淀粉酶基因序列并列出其在大肠杆菌中表达的实验步骤.

设计一个试验,现已知某环境中有一种能产生淀粉酶的细菌,请设计一合理实验,获得该细菌中的淀粉酶基因序列并列出其在大肠杆菌中表达的实验步骤.
1.在适当培养基上大量培养该细菌,以取得该淀粉酶的信使RNA.
2.在获得信使RNA以后,应用逆转录酶即可获得淀粉酶的基因序列.
3.在此时即可利用相应的基因工具(限制性内切酶.DNA连接酶),将该基因导入到大肠杆菌体内.
4.在适宜的培养基上大量培养该大肠杆菌,检验是否用淀粉酶生成即可.
该方法优势:细菌和大肠杆菌同属原核生物,其基因的表达区中不含内含子,无需用鸟枪法.且该方法具有更强的专一性,大大减少实验的工作量,及成功率.

1、在适当的环境中培养若干该细菌。
2、在另一个培养基上培养足量的大肠杆菌。
3、用相同的限制性内切酶切下该基因序列片段。
4、用DNA连接酶将该片段连接在大肠杆菌的粘性末端。
5、一段时间后,检测培养基中是否有该淀粉酶。

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