为什么用Folin酚法和考马斯亮蓝法测蛋白质含量,结果会有很大差异实验是用牛血清蛋白制作标准曲线,测定白菜中的蛋白质含量,用Folin酚法和考马斯亮蓝法分别测,结果会有很大差异(Folin酚法

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/27 17:34:15
为什么用Folin酚法和考马斯亮蓝法测蛋白质含量,结果会有很大差异实验是用牛血清蛋白制作标准曲线,测定白菜中的蛋白质含量,用Folin酚法和考马斯亮蓝法分别测,结果会有很大差异(Folin酚法

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为什么用Folin酚法和考马斯亮蓝法测蛋白质含量,结果会有很大差异
实验是用牛血清蛋白制作标准曲线,测定白菜中的蛋白质含量,用Folin酚法和考马斯亮蓝法分别测,结果会有很大差异(Folin酚法是考马斯法的大概两三倍).大家都是这个结果,所应应该不是操作失误.那么从原理上分析可能是什么原因呢?

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大概与样品中的干扰物质有关.
干扰Folin酚法的物质有:酚类、柠檬酸、硫酸铵、Tris缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油等.
干扰考马斯法的:主要是去污剂,如 Triton X-100、十二烷基硫酸钠(SDS)和0.1N的NaOH.(如同0.1N的酸干扰Lowary法一样).
植物样品经常会含有酚类、有机酸等,提取蛋白可能用到Tris,这是常见的干扰物.检查一下操作程序吧.
测定浓度时用buffer作空白对照了吧?

测定蛋白质含量,有多种方法,其中考马斯亮蓝法和Folin酚法是灵敏度最高的两种方法,各有优缺点:考马斯亮蓝法干扰物质少,颜色稳定, 颜色深浅随不同蛋白质变化,标准曲线有轻微的非线性;Folin酚法操作要严格计时,颜色深浅随不同蛋白质变化,标准曲线不是严格的直线形式,且专一性差。因此,各方法并不能在任何条件下适用于任何形式的蛋白质。
Folin酚法干扰物质较多,不适于硫柳汞做防腐剂的样品和核...

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测定蛋白质含量,有多种方法,其中考马斯亮蓝法和Folin酚法是灵敏度最高的两种方法,各有优缺点:考马斯亮蓝法干扰物质少,颜色稳定, 颜色深浅随不同蛋白质变化,标准曲线有轻微的非线性;Folin酚法操作要严格计时,颜色深浅随不同蛋白质变化,标准曲线不是严格的直线形式,且专一性差。因此,各方法并不能在任何条件下适用于任何形式的蛋白质。
Folin酚法干扰物质较多,不适于硫柳汞做防腐剂的样品和核酸含量较高的样品检测;蛋白糖化物对考马斯亮蓝法存在干扰,因此,应用考马斯亮蓝法测定含糖基蛋白的制品时需进一步改进。

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用Folin酚法和考马斯亮蓝法测蛋白质浓度哪个高既然有很多物质干扰folin酚测定,那么蓝色应该越浅,浓度应该越低,为什么结果反而比考马斯亮蓝还高 为什么用Folin酚法和考马斯亮蓝法测蛋白质含量,结果会有很大差异实验是用牛血清蛋白制作标准曲线,测定白菜中的蛋白质含量,用Folin酚法和考马斯亮蓝法分别测,结果会有很大差异(Folin酚法 folin-酚与考马斯亮蓝两种方法测白菜叶蛋白质含量为什么结果相差很大 凯氏定氮法,双缩尿法、Folin-酚试剂法和紫外吸收法、考马斯亮蓝法、BCA法的原理和大体过程 蛋白质中角蛋白含量较高的话,用什么方法测蛋白含量比较简单准确.folin-酚法,考马斯亮蓝染色法哪个比较准? 比较紫外吸收法,双缩脲法,Folin酚法,考马斯亮蓝G250法测定蛋白质含量优缺点 为什么用folin-酚法测定蛋白质的含量要先做标准曲线又为什么用folin-酚法测定蛋白质的含量较双缩脲法灵敏100倍 用考马斯亮蓝法测蛋白含量,为什么要稀释蛋白? folin酚试剂法测定蛋白质含量 为什么要用空白管?为什么要用5支试管? Folin酚试剂法的优点 哪些书有Folin--酚试剂法. Folin-酚试剂法测定蛋白质含量为什么比双缩脲法灵敏? Folin酚试剂法为什么要设定5组标准管? 考马斯法测得的蛋白质含量为什么比BCA法少 为什么实验室都是用考马斯亮蓝测蛋白而不用茚三酮呢 豆芽中的蛋白质含量用考马斯蓝G-250测定的原理和方法? 加入folin-酚试剂后,为什么要慢速摇匀 考马斯亮蓝测蛋白浓度为什么出现负值