我要分离纯化一种未知酶,一切未知,想用凝胶层析和离子交换层析分离,不知选用什么填料合适?有好的建议

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/28 07:16:40
我要分离纯化一种未知酶,一切未知,想用凝胶层析和离子交换层析分离,不知选用什么填料合适?有好的建议

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建议用离子交换层析.凝胶过滤层析流速慢,上样量低,而且分离效果一般,凝胶过滤一般用于层析的后期包括除盐,去除降解片段之类的.
离子交换一般就用到DEAE,因为大部分蛋白都偏酸.要是你的酶是碱性蛋白,那就更好办,上个CM柱,其他杂蛋白就留不下多少了.
所以先拿DEAE试试吧.

不知道分子量,分子筛就不太好选,可以先做个非变性的PAGE看一下分子量。离子交换用DEAE或CM都行,反正非此即彼。

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