作业帮石蜡切片免疫组化染色实验方法是什么?
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/07 08:24:29
石蜡切片免疫组化染色实验方法是什么?
石蜡切片免疫组化染色实验方法是什么?
石蜡切片免疫组化染色实验方法是什么?
1 、载玻片的处理： 抗原修复过程中,由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响,极易造成脱片.为保证试验的正常进行,可选用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI-9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等几种试剂,对已清洗的载玻片进行处理.具体方法如下： 1.1 APES：现用现配.将洗净的玻片放入以1:50比例丙酮稀释的APES中,停留20~30秒钟,取出稍停片刻,再入纯丙酮溶液或蒸馏水中涮去未结合的APES,置通风橱中晾干即可.用此载玻片捞片时应注意组织要一步到位,并尽量减少气泡的存在,以免影响染色结果. 1.2 HistogripTM：将洗净的玻片放入以1:50比例丙酮稀释的Histogrip液中,停留1~2分钟,然后用双蒸水快速清洗三次,室温干燥或60oC烤箱烘烤一小时,装盒备用. 1.3 Poly-L-Lysine：将洗净、干燥的载玻片放入以1:10比例去离子水稀释的多聚赖氨酸溶液中,浸泡5分钟,60oC烤箱烘烤一小时或室温过夜干燥.装盒备用.试验中使用的器具均为非玻璃制品. 2 、常用酶消化： 2.1 胰蛋白酶：一般使用浓度为0.05%~0.1%,消化时间为37℃、10~40分钟,主要用于细胞内抗原的显示. 2.2 胃蛋白酶：一般使用浓度为0.4%,消化时间为37℃、30~180分钟,主要用于细胞间质抗原的显示,如：Laminin（层粘蛋白）,Collagen IV（IV型胶原）等. 2.3 皂素（Saponin）：一般使用浓度为2~10g/ml的saponin溶液,消化时间为室温孵育30分钟. 3 、抗原热修复： 可根据实验室的具体条件,选用微波炉抗原修复、高压锅抗原修复或水浴高温抗原修复.抗原热修复可选用各种缓冲液,如TBS、PBS、重金属盐溶液等,但实验证明,以0.01M枸橼酸盐缓冲液（pH6.0）效果最好.请选用我公司提供的ZLI-9064 枸橼酸盐缓冲液（粉剂）配制,取该粉剂一包溶于1000ml的蒸馏水中,混匀,其pH值在6.0 ± 0.1,如因蒸馏水本身造成的pH值偏差,请自行调整. ……………… 详细资料请参考：on http://www.bio1000.com/experiment/immunology/228697.html
满意请采纳