RNA用反转录试剂盒进行反转录时,一定要知道RNA的含量吗?请高手赐教!谢谢!

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/03 17:41:07
RNA用反转录试剂盒进行反转录时,一定要知道RNA的含量吗?请高手赐教!谢谢!

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请高手赐教!谢谢!

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询问卖试剂盒的公司 效果比较好.其次是查文献和上论坛提问 同种材料 同种试剂盒 别人做过的 可比性较高.如果是直接说明针对某种样品 说明了取多大样品量的 往往就是取样了一路按说明做.成功与否与样品本身和试剂盒质量有关.如果是已经提了RNA的,只反转录 若试剂盒上说明了可收拾的模板的量的范围的 取其内的一个值 除以浓度( 溶解提取的RNA后 比色法测定 用核酸蛋白微量测定仪 或者紫外分光光度计 记录od值 换算出以微克每毫升表示的浓度值 这一步也得到衡量提取物的品质的od值比 一般要求在一个范围之中 才认为后续使用比较保险 说不定还需纯化或 直接要重提以保质保量的) 计算好取样的体积 取了上样 使用试剂盒转录.

恩 最好知道 这样才能按照一定的比例添加试剂 毕竟一定量的反转录酶只能处理一定量的RNA 如果你RNA过量可能影响反转录 如果太少可能转不出来

看你做什么吧,一般都是要知道含量然后才构建体系进行反转录,像你要是做RT-PCR的话,那个含量都不能太高了。
除了含量,纯度是很重要的。